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佛罗伦萨大学可以追溯到1321年由佛罗伦萨共和国建立的大学。最初，民法和教规、文学和医学都是在该研究所教授的科目，并邀请了许多著名的学者在那里授课：吉奥瓦尼·博卡乔被邀请去讲授神曲。然而，1349年，波波·克莱门特六世（Popo Clemente VI）用公牛充分认识到了该研究所的重要性，他正式授权该研究所授予普通学位，扩大了最高特权，并确定第一个意大利神学学院将设在佛罗伦萨。1364年，在卡洛七世皇帝的带领下，佛罗伦萨的学府变成了一所帝国大学。然而，当洛伦佐大帝控制了佛罗伦萨和托斯卡纳的大部分地区后，1473年，这间书房搬到了比萨。卡洛八世从1497-1515年将其移回佛罗伦萨，但随着美第奇家族的回归，它再次被转移到比萨。尽管采取了这些措施，许多教学活动仍在佛罗伦萨继续进行，科学研究在当时的各种学院中得到了实质性的支持，如克鲁斯卡和西门托。直到1859年，当大公被流放时，所有这些独立的教学活动才重新统一在一个叫做“Studito di Studi Pratici e di Perfezionamento”的合适系统中；一年后，这所学校被意大利统一政府承认为一所成熟的大学。1923年，根据议会的一项特别法案，该学院被正式命名为一所大学。后来，这所新的大学被组织成不同的学院：农业、建筑、艺术、经济、教育、法律、数学、物理和自然科学、医学和外科、药学和政治学。工程学院自1928年开始开设2年课程，1970年增加到10个学院。
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